冷冻时最好不要把血清和血细胞一起冷冻。如何在冷冻过程中培养无血清的细胞，可以通过将无血清培养基与含10%二甲基亚砜的新鲜无血清培养基以1: 1的比例混合来实现，冷冻过程:消化贴壁细胞或收集悬浮细胞，收集离心管中的细胞悬浮液并以1000rpm离心10分钟，弃去上清液并用一定量的冷冻培养基重新悬浮细胞，计数并调整细胞密度至每毫升约100个细胞，将细胞悬液分装于2ml冻存管中，每管1ml。密封冷冻保存喷嘴，贴上标签并记录冷却情况:4度1h，负20度1h，负80度18h或过夜，液氮。
1、细胞培养(换液/传代/冻存/复苏
所需试剂细胞完全培养基:★推荐使用海星生物细胞专用培养基。1.细胞处理后第二天在显微镜下观察细胞状态。如果死细胞多，细胞密度低，就要换液了。(1)请在高倍显微镜下观察悬浮细胞。一般来说，活细胞轮廓圆润，边界清晰，透明度大，折光性强。如果细胞活力高，正常培养将继续。(2)如果观察到较多的贴壁细胞漂浮，请在高倍显微镜下观察，以确定漂浮的细胞是死细胞还是尚未贴壁的活细胞。
(3)正常培养时，部分半贴壁细胞会漂浮是正常现象。请在高倍显微镜下观察，确定漂浮细胞是否为死细胞。如果细胞活力高，正常培养将继续。2.如需换液，参照以下步骤:(1)悬浮细胞:收集培养容器中所有细胞悬液。将250g离心4分钟，弃去上清液。使用预热的完全培养基，将细胞悬浮液接种到合适的培养容器中。(2)贴壁细胞:直接丢弃培养容器中的上清液，在原培养容器中加入预热的完全培养基。
2、转染实验可以加血清?血清都有哪些参数?
血清主要参数血清可以提供细胞生长所必需的生长因子和营养元素。有些细胞，尤其是转化细胞，对血清的需求非常低，大约0.5%。有些细胞是“培养”出来的，只在低血清浓度的培养基中存活。因为细胞生长所需的物质已经完全表征，所以更多的细胞在添加了特定物质的基础培养基中培养。如果细胞可以在没有血清的培养基中存活，这是一种幸运的情况。
血清的种类有些细胞偏爱马血清，组织细胞培养的标准血清是小牛血清，而有些细胞需要更贵的胎牛血清，有些细胞(尤其是人)需要同种最贵的生物血清。血清是热灭活的吗？血清的某些成分会因受热而失活，如补体。我能在哪里得到血清？因为特定细胞只能使用特定血清，所以使用前请询问实验室工作人员或正在培养细胞的人员。虽然不同公司价格不同，但是血清的选择标准不应该是省钱。
3、RAW264.7细胞培养传代及冻存处理
RAW264.7小鼠单核巨噬细胞来源于艾贝尔森小鼠白血病病毒诱导的肿瘤组织，是科学研究中常用的炎症细胞模型之一。RAW264.7细胞系是合适的转染宿主。细胞会喝中性红，吞食乳胶珠和酵母多糖。他们可以依靠抗体来溶解绵羊红细胞和肿瘤细胞靶。用LPS或PPD处理2天可以刺激红细胞裂解，但不能刺激肿瘤细胞靶向。提前开启紫外线30分钟消毒灭菌，工作台上开灯10分钟，用75%酒精擦拭工作台上的培养基:DMEM 10sps，培养皿，无血清冻存液等培养条件。气相:95%空气，5%二氧化碳；温度:37a。在37水浴中摇动并融化含有1ml原始264.7细胞悬液的冷冻管，加入4mL培养基并混匀。
4、ELISA血液标本冻存和解冻方法
1。血液最好放在37度的水浴箱中1小时左右，有助于纤维蛋白原凝集。冷冻的时候也最好不要把血清和血细胞一起冷冻。血细胞反复冻融后会破碎，里面的物质很容易混入血清。其实血清冷冻后是会分层的，你拿到的那部分并不代表血清的整体情况。做测试前，需要在血清融化后搅拌均匀。
但是，必须注意的是，溶解过程必须定期均匀摇动。3.血清解冻后发现絮状沉淀怎么办？当血清解冻(包括未完全解冻)或储存于28℃时，血清中的各种蛋白质和脂蛋白(如凝集素、纤维蛋白原、玻连蛋白等)可汇聚成团，形成絮状沉淀或混浊外观；在运输过程中，因为时间长，经常会有一点解冻，所以可能会有一点沉淀，但这些都不影响血清性能。
5、将细胞冻存液10%DMSO加90%胎牛血清配制好了以后如何保存,能保存…
只要无污染，不超过培养基的保存期限，就可以使用。即使过期后补充一点L-谷氨酸，也可以再次使用，因为谷氨酸容易降解。DMSO通常应该是新鲜的、包装的和储存的。如果多次打开，可能会因氧化而变质。如果你的DMSO是黄色的，说明已经变质，不能用了。保存方法:一般4℃放置2h；然后转20℃2h；80℃，2h；最后放入液氮罐(196℃)，储存时间理论上是无限的。
6、细胞冻在-80冻和液氮冻的区别
保存原理差不多，都是低温保存。最大的区别是液氮的温度低，储存时间会相对长一些。将细胞放在液氮表面10厘米处，离罐口20厘米处，盖紧液氮罐。液氮的温度会变吗？液氮的温度变化和它有什么关系？液氮的温度与压力有关。如果压力高，温度会高于77k。如果压力小，则为，否则为；这个压力是相对于正常压力而言的。液氮的密度在196℃时为0.8083克/立方厘米，
7、我的细胞培养不用血清,冻存要怎么样
细胞培养不需要血清，将无血清培养基与含10%二甲基亚砜的新鲜无血清培养基以1: 1的比例混合即可进行冻存。冷冻过程:消化贴壁细胞或收集悬浮细胞，将细胞悬液收集到离心管中，以1000rpm离心10分钟，弃去上清液，用一定量的冷冻保存液重悬细胞，计数并调整细胞密度至每毫升约100个细胞。将细胞悬液分装于2ml冻存管中，每管1ml，密封冷冻保存喷嘴，贴上标签并记录冷却情况:4度1h，负20度1h，负80度18h或过夜，液氮。